黃嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase XOD)主要存在于哺乳動(dòng)物的乳汁及肝脾中,屬需氧脫氫酶類(lèi),是體內(nèi)核酸代謝中的重要酶,在肝細(xì)胞損傷時(shí),此酶早于SGPT釋放于血清中,并且升高明顯,其對(duì)鑒別肝細(xì)胞性黃疸及阻塞性黃疸有明顯的測(cè)定意義,并且在缺氧過(guò)程中黃嘌呤脫氫酶很快形成黃嘌呤氧化酶,其對(duì)自由基的產(chǎn)生起了重要作用。
XOD可催化次黃嘌呤生成黃嘌呤,與此同時(shí)產(chǎn)生超氧陰離子自由基,當(dāng)有電子受體及顯色劑存在的情況下,生成紫紅色結(jié)合物,根據(jù)后者生成量的多少可以推算出XOD的活力。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約30分鐘,可測(cè)50左右個(gè)樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20l~50l即可測(cè)紅細(xì)胞中的XOD,只需2ml
3、靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的XOD及血小板中XOD,只需5mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的XOD、0.2g組4、織可測(cè)線粒體及微粒體中的XOD。
5、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
6、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.6%。
7、回收試驗(yàn): X =102.5%。
8、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
9、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)等,效果均佳。
所需儀器:
1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為530nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測(cè)定。
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和試劑
2、漩渦混勻,37℃孵育20分鐘
3、加入終止液
4、530nm波長(zhǎng),1cm光徑,比色
批間CV
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批內(nèi)CV
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回收率
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最底檢出線
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檢測(cè)范圍
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3.32
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1.5
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102
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0.09U/L
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0-71.9 U/L
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本試劑盒保存期:3個(gè)月。貯存溫度:2~8℃,特別提醒R1、 R4試劑需放在-20℃冷凍保存。